RESUMO O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da estimulação elétrica de alta voltagem (EEAV) catódica, associada à insulina tópica, em lesão tegumentar de ratos. Para isso, foram utilizados 42 ratos Wistar (240±30 g), submetidos a retirada cirúrgica de 1 cm2 de pele do dorso em seis grupos (n=7), tratados por sete dias consecutivos: controle (C), estimulação elétrica placebo (EP), estimulação elétrica catódica (EE), insulina tópica (IT), insulina placebo (IP) e EEAV associada a insulina tópica (EE+I). A EEAV foi administrada 24 horas após a cirurgia, 30 minutos por dia, com frequência de 100 Hz e voltagem média de 60 V, mantida no limiar motor. Áreas das lesões foram registradas macroscopicamente no primeiro, quarto e oitavo dia, sendo submetidas a tratamento histológico para inclusão em paraplast® e coloração em hematoxilina e eosina. A epitelização e o perfil numérico das células foram obtidos por análises histométricas. Utilizou-se o teste de Shapiro-Wilk e ANOVA one-way seguida de Bonferrone (p<0,05). Observou-se redução significativa na área da lesão no oitavo dia de tratamento, nos grupos EE e EE+I em relação aos demais grupos. A reepitelização não diferiu entre os grupos, mas a distância entre as bordas da lesão foi menor nos grupos EE e EE+I. Nesses grupos houve aumento significativo (p<0,05) no número de fibroblastos e diminuição de leucócitos. Pode-se concluir que a EEAV catódica acelerou o processo de reparação da lesão, não demonstrando efeito adicional com a aplicação da insulina tópica.

ABSTRACT This study aims to evaluate the effect of cathodic high voltage electrical stimulation (HVES), associated with topical insulin, on rat integumentary lesions. For this purpose, 42 Wistar rats (240±30 g) were submitted to surgical removal of 1 cm2 of dorsal skin and divided into six groups (n=7), treated for seven consecutive days: Control (C), placebo electrical stimulation (PES), cathodic electrical stimulation (ES), topical insulin (TI), placebo insulin (PI) and HVES associated with topical insulin (ES+I). HVES was administered 24 hours after surgery, 30 minutes per day, with a frequency of 100 Hz and a mean voltage of 60 V, maintained at the motor threshold. Lesion areas were recorded macroscopically on the first, fourth and eighth day, submitted to histological treatment for inclusion in paraplast® and staining in Hematoxylin and Eosin. Epithelialization and the numerical profile of the cells were obtained by histometric analysis. The Shapiro-Wilk and Anova one-way test was followed by the Bonferroni (p<0.05). There was a significant reduction in the area of the lesion by the eighth day of treatment, both in the ES and ES+I groups, when compared with other groups. Reepithelialization did not differ between groups, but the distance between the edges of the lesion was lower in the ES and ES+I groups. These same groups showed a significant increase (p<0.05) in the number of fibroblasts and a decrease in leukocytes. Thus, we can conclude that cathodic HVES accelerated the lesion repair process, with the topical application of insulin showing no additional effect.

RESUMEN El propósito de este estudio fue evaluar el resultado de la estimulación eléctrica por alta voltaje (EEAV) catódica, asociada a la insulina tópica, en lesión cutánea de ratas. Para ello, se utilizaron 42 ratas Wistar (240±30 g), les sometieron a cirugía de retirada de 1 cm2 de piel del dorso en 6 grupos (n=7), y les trataron por siete días consecutivos: control (C), estimulación eléctrica placebo (EP), estimulación eléctrica catódica (EE), insulina tópica (IT), insulina placebo (IP) y EEAV asociada a la insulina tópica (EE+I). Se aplicó la EEAV 24 horas después de la cirugía, 30 minutos por día, con frecuencia de 100 Hz y voltaje de media tensión de 60 V, y la mantuvo en el umbral motor. Se registraron las áreas de las lesiones macroscópicamente en el primer, cuarto y octavo día, y las sometieron al tratamiento histológico para inclusión en paraplast® y tinción hematoxilina-eosina. Se obtuvo la epitelización y el perfil numérico de las células por análisis histométricos. Se empleó la prueba Shapiro-Wilk y ANOVA one way de Bonferroni (p<0,05). Se redujo significativamente el área de la lesión en el octavo día del tratamiento en los grupos EE y EE+I comparados a los demás grupos. La reepitalización no fue distinta entre los grupos, sin embargo, la distancia entre los bordes de la lesión fue menor en los grupos EE y EE+I. También en estos grupos aumentó significativamente (p<0,05) el número de fibroblastos y disminuyeron los leucocitos. Se concluye que la EEAV catódica aceleró el proceso de reparación de la lesión, pero no ocurrió resultado con la aplicación de la insulina tópica.

O objetivo desse trabalho foi investigar o efeito da estimulação elétrica neuromuscular (EE) sobre o perfil metabólico e morfométrico do músculo tibial anterior, antagonista ao músculo sóleo, o qual foi estimulado, sob a condição de imobilização articular de tornozelo durante 7 e 15 dias. A imobilização promoveu redução na massa muscular (I7: 17,36%, I15: 20,83%), no conteúdo de glicogênio (I7: 48%, I15: 48%), na área das fibras musculares (I7: 27%, I15: 40%) e aumento na densidade do tecido conjuntivo intramuscular (I7: 122%, I15: 206%). A EE não promoveu alterações significativas na massa muscular dos grupos imobilizados, porém, promoveu aumento no glicogênio (IEE7: 31,25%; IEE15: 56,25%), redução na área das fibras musculares (IEE7: 14%, IEE15: 24,69%) e redução na densidade do tecido conjuntivo de (IEE7: 25,63%, IEE15: 49,09%) quando comparado aos respectivos grupos imobilizados.

The aim of this work was to investigate the effect of the neuromuscular electrical stimulation (ES) on the metabolic and morfometric profile of the tibialis anterior muscle, antagonist to the soleus muscle which was stimulate, under the joint immobilization condition of the ankle for 7 and 15 days. The immobilization promoted the reduction in the muscle mass (I7: 17.36%, I15: 20.83%), in the glycogen content (I7: 48%, I15: 48%), in the muscle fibers areas (I7: 27%, I15: 40%) and increase in intramuscular connective tissue density (I7: 122%, I15: 206%). The EE didn't promote significant alterations in the mass of the immobilized groups, however, promoted increase in the glycogen (IEE7: 31.25%; IEE15: 56.25%), reduction in the muscle fibers areas (IEE7: 14%, IEE15: 24.69%) and reduction in the connective tissue density (IEE7: 25.63%, IEE15: 49.09%) when compared with the respective immobilized groups.

A proposta deste trabalho foi avaliar o músculo sóleo (S) de ratos submetidos à imobilização articular por sete dias, associado ou não ao tratamento com metformina (MET, 1,4mg.ml-1) por meio de análises morfométricas. Ratos adultos Wistar (n = 5) foram divididos nos grupos: controle (C), imobilizado em posição neutra do tornozelo (I), tratado com metformina (M), imobilizado tratado com metformina (I + MET). Foram avaliadas a área das fibras, a densidade de área do tecido conjuntivo intramuscular e a massa muscular do S. A análise estatística foi realizada pelo teste de normalidade, ANOVA e de Tukey (p < 0,05). A imobilização reduziu o peso muscular (mg) do S (34%). No grupo M não houve alteração significativa do peso muscular quando comparado com o grupo C. Já no grupo I + MET foi observado aumento do peso muscular em 29,6% quando comparado com o grupo I. O tratamento com metformina não alterou a área da fibra muscular quando comparado com grupo C. Já no grupo I, houve redução de 44% na área da fibra. Com relação ao grupo I + MET, houve aumento de 22% quando comparado com o grupo I. Por outro lado, ao compararmos o grupo C com o grupo I + MET, houve redução de 31%. Ao avaliar a densidade de área do tecido conjuntivo, observou-se que o grupo I apresentou elevação de 216% quando comparado com o grupo C. No grupo I + MET, houve redução de 67% comparado com o grupo I. O tratamento com metformina em músculos submetidos à imobilização minimizou a redução da área das fibras do S, bem como o aumento do tecido conjuntivo. Esses resultados sugerem que a metformina pode favorecer recuperação mais rápida na fase pós-imobilização.

The aim of this study was to evaluate the effect of metformin treatment on the muscle mass, fibers area and connective tissue area density in soleus (S) muscle under articular immobilization. METHODS AND RESULTS: Male Wistar rats (250-300g) were divided in 4 groups (n=5): control, treated with metformin, immobilized and immobilized treated with metformin. Immobilization was performed by acrylic resin orthoses on the left hindlimb keeping the ankle in neutral position during 7 days. The animals were euthanatized and the S muscle was dissected and weighed. Samples of its ventral portion were treated for inclusion in paraffin and stained in Hematoxylin-Eosin (H:E). The results were obtained through analyses of the muscular fiber area (images analyzed - Image Pró-plus 4,0), as well as of intramuscular connective tissue by means of planimetry. The statistical analysis was performed by normality test followed by ANOVA and Tukey (p<0.05). Hindlimb immobilization during 7 days promoted significant reduction (p<0.05) of 35% in the muscular mass; 44% (p<0.05) in the fiber area and increase of 216% (p<0.05) in the intramuscular connective tissue. The metformin in immobilized group promoted significant alterations (p<0.05) in the muscular mass. In addiction, it was observed significant increase (p<0.05) of 29.6% in the fibers area and significant reduction (p<0.05) of 67% in the intramuscular connective tissue. CONCLUSION: The metformin treatment minimized the reduction of muscle fibers area, as well as the increase of connective tissue in hindlimb immobilized muscle. These results suggest that metformin should be used to increase fast muscle recovery after hindlimb immobilization.

O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da estimulação elétrica neuromuscular (EE) fásica sobre os parâmetros morfométrico e metabólico do músculo sóleo de ratos, nos períodos de 3, 7 e 15 dias. Ratos Wistar foram divididos em 4 grupos (n=5): controle (C), EE por 3 dias (EE-3), 7 dias (EE-7) e 15 dias (EE-15). Foram analisado o conteúdo de glicogênio, massa muscular, área das fibras e densidade de área do tecido conjuntivo intramuscular. A análise estatística foi realizada pela ANOVA e Tukey (p<0,05). Com relação à massa muscular, ocorreu aumento significativo no EE-15 de 11,55% comparado ao C. O conteúdo de glicogênio muscular não apresentou alterações significativas no EE-3 quando comparado ao C. Já o EE-7 e EE-15 demonstraram aumento significativo de 74,19% e 80,64%, respectivamente, comparados ao C. Na análise morfométrica, ocorreu aumento significativo no EE-15 de 16,23% em relação ao C. A densidade do tecido conjuntivo intramuscular não apresentou alterações significativas em todos os grupos submetidos à EE quando comparados com o C. A EE promoveu aumento das reservas de glicogênio nos períodos de 7 e 15 dias, bem como aumento na massa muscular, área das fibras e nas reservas de glicogênio no período de 15 dias.

The aim of this work was to evaluate the effect of phasic neuromuscular electric stimulation (ES) on morphometric and metabolic parameters of rats' soleus muscles for 3, 7and 15 days. Wistar rats were divided into four groups (n=5): control (C), ES for 3 days (ES-3), ES for 7 days (ES-7) and ES for 15 days (ES-15). Glycogen content, muscle mass, fibers area and area fraction of the intramuscular connective tissue were assessed. The statistical analysis was performed by ANOVA and Tukey (p<0.05). Regarding muscle mass, there was a significant increase in ES-15 (11.55%) compared to C. The glycogen content didn't show significant changes in ES-3 when compared to C. ES-7 and ES-15 showed the significant increase of 74.19% and 80.64%, respectively, compared to C. In the morphometric analysis, a significant increase in ES-15 (16.23%) compared to C was found. The area fraction of the intramuscular connective tissue didn't present significant changes in all groups submitted to ES when compared to C. The ES fostered an increase of the glycogen content in 7 and 15 days, as well as increased muscle mass, fibers area and glycogen content in 15 days.